產(chǎn)品特色：

1、本裂解液經(jīng)過(guò)優(yōu)化配方，在裂解紅細(xì)胞的同時(shí)幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(lymphocyte) 或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞；

2、本裂解液的主要有效成分為氯化銨；

3、本裂解液不適用于有細(xì)胞核紅細(xì)胞的裂解，例如鳥(niǎo)或禽類(lèi)的紅細(xì)胞。

操作步驟：

對(duì)于組織細(xì)胞樣品：

1. 新鮮組織經(jīng)過(guò)膠原酶或胰酶等消化處理，通過(guò)適當(dāng)方法分散成細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2. 加入 3-5 倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 1-2 分鐘。例如 細(xì)胞沉淀的體積為1ml，則加入 3-5ml 的紅細(xì)胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作均可。

3. 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4oC 離心效果更佳。

4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。

5. 洗滌 1-2 次：加入適量 PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，400-500g 離心 2-3 分鐘，棄上清。可再重復(fù) 1 次， 共洗滌 1-2 次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的 5 倍。4oC 離心效果更佳。

6. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

對(duì)于組織細(xì)胞樣品（無(wú)洗滌）：

1. 新鮮組織經(jīng)過(guò)膠原酶或胰酶等消化處理，通過(guò)適當(dāng)方法分散成細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2. 對(duì)于 0.2ml 細(xì)胞沉淀加入 1ml 紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 1-2 分鐘。本步驟在室溫或 4oC 操作均可。

3. 加入 15-20ml PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，混勻。

4. 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4oC 離心效果更佳。

5. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。

6. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

說(shuō)明：對(duì)于常規(guī)步驟，多一步洗滌過(guò)程中的離心，但可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一些，同時(shí)不需要大體積的 離心管。快速步驟少了一次離心，但洗滌效果略差一些，同時(shí)需要大體積的離心管。

對(duì)于血液樣品：

1. 取新鮮抗凝血，400-500g 離心 5 分鐘，離心棄上清。

2. 加入 6-10 倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 1-2 分鐘。例如細(xì)胞沉淀的體積為 1ml，則加入 6-10ml 的紅細(xì)胞裂解液。本步驟在室溫或 4 度操作均可。

注意：對(duì)于鼠的血液，裂解 1-2 分鐘已經(jīng)足夠，對(duì)于人的外周血，宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間至 4-5 分鐘，并且裂解過(guò)程中宜適當(dāng)偶爾搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。

3. 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4oC 離心效果更佳。

4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。

5. 洗滌 1-2 次：加入適量 PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，400-500g 離心 2-3 分鐘，棄上清。可再重復(fù) 1 次， 共洗滌 1-2 次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的 5 倍。4oC 離心效果更佳。

6. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

注意：對(duì)于微量或少量的血液樣品，可以在第一步中不進(jìn)行離心棄上清的操作，直接在第二步中加入 10 倍血液體積的紅細(xì)胞裂解液，并在室溫或 4oC 裂解 4-5 分鐘。對(duì)于鼠的血液，裂解 4-5 分鐘已經(jīng)足夠，對(duì)于人的外周血，宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間至 10 分鐘，但通常不宜超過(guò) 15 分鐘，并且裂解過(guò)程中宜適當(dāng)偶爾搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。后續(xù)步驟相同。

對(duì)于血液樣品（無(wú)洗滌）：

1. 每 1ml 新鮮抗凝血中加入 10ml 紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 4-5 分鐘。本步驟在室溫或 4 度操作均可。

注意：對(duì)于鼠的 血液，裂解 4-5 分鐘已經(jīng)足夠，對(duì)于人的外周血，宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間至 10 分鐘，但通常不宜超過(guò) 15 分鐘，并且裂解過(guò)程中宜適 當(dāng)偶爾搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。

2. 加入 20-30ml PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，混勻。

3. 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4oC 離心效果更佳。

4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的一些檢測(cè)。

5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計(jì)數(shù)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

說(shuō)明：對(duì)于常規(guī)步驟，多一步洗滌過(guò)程的離心，但可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一些，同時(shí)不需要大體積的離 心管。快速步驟少了一次離心，但洗滌效果略差一些，同時(shí)需要大體積的離心管。